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1、 引物设计和组成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列剖析标明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计组成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV 6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型HPV。

尖锐湿疣可以吃螃蟹吗2、PCR反响试剂:Taq DNA聚合酶(2U/ml)、10mmol/L dNTP贮备液(dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L),10×PCR缓冲液(500mmol KCl、40mmol/L MgCl2、100mmol/L Tris-HCl、pH 8.5),100μmol/L MY11和MY09贮备液,灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。

3、PCR扩增办法和程序:以100μl PCR反响液,用无菌0.5ml硅化塑料离心管为反响管进行扩增反响。

尖锐湿疣可以吃什么菜(1)实验前配制预混反响试剂并分装。预混反响试剂包括除标本DNA外的其它各种PCR反响试剂。

(2)各反响管顺次参加10μl标本和90μl预混反响试剂。

(3)参加80-100μl石蜡油,在台式离心机上疾速离心数秒钟,使各反响试剂搜集于油层下。当前,PCR试剂已商品化,反响体积为25μl。运用时只参加标本DNA即可。

尖锐湿疣可以吃什么水果4、每次实验应设阳性及阴性对照。以载有HPV的重组质粒(每反响为100pg)或含有HPV的细胞系(如Caski、HeLa)DNA为阳性对照,以无HPV的人细胞系DNA为阴性对照。

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